Análisis de la eliminación de detritus urinario de pacientes con cáncer, tratados con virus oncolítico Wt1-5.

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Universidad Distrital Francisco José de Caldas

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Resumen

Oncolytic virotherapy has emerged as a promising strategy in cancer research. In this study, the elimination of the oncolytic virus Wt1-5 in the urine of five cancer patients treated with this virus was evaluated by detecting viral proteins and assessing its ability to infect U937 cells in culture. Urine samples were collected at different post-application times (24–504 h), and the presence of viral particles was analyzed through SDS-PAGE, Western Blot, immunofluorescence, flow cytometry, and capture ELISA. Viral proteins were detected in urinary debris, indicating virus excretion through this route. Additionally, part of the eliminated virus retained its infective capacity, as it successfully infected U937 cells in vitro. Results showed that the highest amount of viral particles in urine occurred between 24–96 hours post-application, with a progressive reduction starting at 72 hours, and complete elimination at approximately 21 days. Immunofluorescence and flow cytometry revealed variations in cellular infection depending on urine collection time, suggesting dynamic viral shedding. The capture ELISA indicated the presence of free viral proteins, suggesting that part of the virus is eliminated as non-infectious fragments. It is concluded that the oncolytic virus Wt1-5 is excreted in urine and that part of it retains infective capacity, highlighting the need to evaluate its elimination and persistence in biological fluids.

Descripción

La viroterapia oncolítica ha surgido como una estrategia prometedora en la investigación contra el cáncer. En este estudio, se evaluó la eliminación del virus oncolítico Wt1-5 en la orina de 5 pacientes con diferentes tipos de cáncer tratados con este virus, mediante la detección de proteínas virales así como su capacidad para infectar células U937 en cultivo. Para ello, se recolectaron muestras de orina en diferentes tiempos post-aplicación (24-504 h), analizándose la presencia de partículas virales mediante SDS-PAGE, Western Blot, inmunofluorescencia, citometría de flujo y ELISA de captura. Se determinó la presencia de proteínas virales en detritus urinario, indicando la excreción del virus por esta vía. Además, se observó que parte del virus eliminado mantiene su capacidad infectiva, al lograr la infección de células U937 in vitro. Los resultados mostraron que la mayor cantidad de partículas virales en orina se detectó entre las 24-96 horas post-aplicación, con una reducción progresiva a partir de las 72 horas, completándose la eliminación en aproximadamente 21 días. La inmunofluorescencia y la citometría de flujo evidenciaron variaciones en la infección celular según el tiempo de recolección de la orina, sugiriendo una eliminación viral dinámica. El ELISA de captura sugiere la presencia de proteínas virales libres, indicando que parte del virus es eliminado en forma de fragmentos no infecciosos. Se concluye que el virus oncolítico Wt1-5 se excreta en la orina y que parte de él conserva su capacidad infectiva, lo que sugiere la necesidad de evaluar su eliminación y persistencia en fluidos biológicos.

Palabras clave

Viroterapia oncolítica, Virus Wt1-5, Excreción viral, Proteínas Virales, Infección in vitro, Citometría de flujo

Materias

Licenciatura en Química -- Tesis y disertaciones académicas , Terapia de gen , Cáncer -- Tumores , Excreción , Orina -- Análisis

Citación