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Title: Contribución Al Estudio De Transportadores En Tripanosomátidos: Clonación De Por Lo Menos Un Gen Codificante Para Proteínas Transportadoras De Nad+
Author: Morales Herrera, David Santiago
metadata.dc.contributor.advisor: Ayala Fajardo, Adis
Rubiano, Claudia Consuelo
Keywords: Transportadores de nucleótidos
Leishmania braziliensis
NAD+
Tripanosomátidos
Date: 5-Aug-2016
Abstract: Cutaneous Leishmaniasis is mainly caused by the parasite Leishmania braziliensis. The OMS estimates that occur between 0.7 and 1.3 million new cases per year therefore it has become a public health problem. For its study, this paper aimed to characterize in silico 3 candidates to NAD+ transporters in Leishmania braziliensis by primary structure analysis, secondary structure prediction and obtaining predictive models of tertiary structure, with which 19 residues conserved in the three candidates are identified, of them two residues are related to the transport of adenine nucleotides, also a high probability to present a regulation by phosphorylation/dephosphorylation but not by acetylation/deacetylation was found. Additionally, the presence of the domain of the family of "Mitochondrial Carriers" characterized by α helices transmembrane 6 was checked. By models from tertiary structure high identity was found with ADP/ATP mitochondrial transporter of the Bos taurus specie, suggesting a possible functional homology and therefore the ability to transport adenine nucleotides specifically NAD+ as ATP/ADP translocase of Chlamydia trachomatis. In addition, the presence of the genes of the three candidates with sizes of 1089, 1014 and 957 bp was checked in the genome of Leishmania braziliensis by experimental methods and recombinant proteins for each were obtained. These results provide strong evidence for further studies to verify their functionality.
Description: La Leishmaniasis cutánea es producida principalmente por el parásito Leishmania braziliensis. La OMS estima que se presentan entre 0,7 y 1,3 millones de casos nuevos al año por lo tanto se ha convertido en un problema de salud pública. Para su estudio este trabajo se planteó como objetivo el de caracterizar in silico 3 candidatos a transportadores de NAD+ en Leishmania braziliensis mediante análisis de estructura primaria, predicción de estructura secundaria y obtención de modelos predictivos de la estructura terciaria, con los que se identificaron 19 residuos conservados en los 3 candidatos de los cuales dos residuos están relacionados con el transporte de nucleótidos de adenina, asimismo se halló una alta probabilidad de presentar una regulación por fosforilación/desfosforilación pero no por acetilación/desacetilación. Adicionalmente se comprobó la presencia del dominio de la familia de “Transportadores mitocondriales” caracterizado por 6 hélices α transmembranales, las cuales también fueron reconocidas. Mediante los modelos de estructura terciaria se comprobó una alta identidad con el transportador mitocondrial de ADP/ATP de la especie Bos taurus lo cual sugiere una posible homología funcional y por lo tanto la capacidad de transportar nucleótidos de adenina específicamente NAD+ como en la translocasa de ATP/ADP de Clamidia trachomatis. Adicionalmente se comprobó la presencia de los genes de los 3 candidatos con tamaños de 1.089, 1.014 y 957 pb en el genoma de Leishmania braziliensis por métodos experimentales y se obtuvieron proteínas recombinantes para cada uno de ellos. Estos resultados constituyen evidencia sólida para continuar con estudios que permitan comprobar su funcionalidad.
URI: http://hdl.handle.net/11349/13232
Appears in Collections:Licenciatura en Química

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